解過程中形成。因此HT需要用酶法或者化學方法水解復雜的酚類物質(zhì)來獲得。自然界里 HT是靠酶法,尤其是葡萄糖苷酶作用下水解作用形成的。然而在實驗室和工廠里酸法使用較多。有人研究過從橄欖油生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的廢水里提取HT,還有人使用酶法合成HT。但是從橄欖葉中直接提取羥基酪醇還沒有受到關注。橄檻葉通常情況下被燒掉或者作為堆肥留在了原來的農(nóng)場里。工業(yè)上對橄欖葉的開發(fā)也只限于作為動物飼料或者本草療法。
橄欖葉中多酚的含量還未知,每100g橄欖葉中多酚含量范圍為1.5-7.0g。但是,可以確定的是橄欖葉中的多酚的成分和橄欖油中的相似。橄欖苦苷和其他的裂環(huán)烯迷萜類構成其基本成分,當然還有一些簡單酚類,例如HT,但是含量很少。
Cristin等研究了用酸和堿提取油橄欖葉及對用酸堿分解油橄欖葉提取物的情況。
取一定量油橄欖葉粉末,用甲醇水溶解,加入1mol/L的鹽酸或NaOH溶液,攪拌2h、溶液分成2份,一份用NaOH或鹽酸中和至中性,另一份攪拌24h后,用NaOH或鹽酸中和至中性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),酸水解2h后,橄欖苦苷含量減小,堿水解2h后,樣品圖譜中橄欖苦苷峰很小。
Ortega-Garcia使用有機溶劑甲醇直接從橄欖葉中提取得到羥基酪醇。將橄欖葉打成粉末,加入甲醇,經(jīng)過劇烈振動以及沉降后,取出甲醇相,在甲醇內(nèi)加入己烷再次劇烈震蕩分離甲醇相。利用液相色譜分離得到羥基酪醇。
Guillermo等將橄欖油生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的HT含量豐富的廢水通過一個強陰離子交換器,然后用水洗脫。然后將洗脫液真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),得到濃縮液。接著使用一種叫做
XAD型的樹脂將其純化。這次使用的洗脫液為乙醇:水等于30:70,收集HT含量不同的組分。接著又比較了HT和Vc的還原力,以及清除自由基能力。發(fā)現(xiàn)物質(zhì)的量相同的情況下,HT顯示了強于VE的三價鐵還原力以及清除自由基的能力Mirela
Rada
等將分子蒸餾技術應用于羥基酪醇的提取中。通過橄欖葉提取物的SPD蒸餾處理,獲高附加值的化合物。過程分為兩步:首先,乙醇浸提橄欖葉,然后和丙三醇混合。分子蒸餾富含橄欖葉提取物的丙三醇混合物,結(jié)果顯示,在壓力為1.5-2.0Mbar溫度為190℃,流速為15mL/min的條件下得到羥基酪醇含量為80.9%的混合物。
Zouhaier等將用藻酸鈣包埋法固定綠膿桿菌休眠細胞,然后利用這種細菌將酪醇轉(zhuǎn)化為羥基酪醇。固定化的細胞耐酪醇的濃度要高于自由態(tài)的細胞,從而顯示了很強的優(yōu)勢。當酪醇的濃度為5g/L,固定于藻酸鈣的細胞單批的生物轉(zhuǎn)化率達到86%。
由于生物催化劑的可重復利用性可以達到四批以上,并且單批產(chǎn)率高于85%,所以固定化
細胞顯示了較為穩(wěn)定的活動穩(wěn)定性。
Noureddine等利用粘質(zhì)沙雷菌,它可以利用酪醇為碳源和氮源,生產(chǎn)羥基酪醇。在粘質(zhì)沙雷菌的P-酪醇濃度為1g/L對數(shù)增長期末尾將P-酪醇濃度調(diào)整為2g/L,經(jīng)過7小時的孵化期后,羥基酪醇的產(chǎn)率為80%s。Juan等使用蘑菇酪氨酸酶合成了羥基酪醇。在酪氨酸酶、Vc以及酪醇存在的條件下,在一定溫度下得到了羥基酪醇。
Noureddine等通過優(yōu)化從橄欖油生產(chǎn)廢水中提取羥基酪醇的過程。實驗發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯是從橄欖油生產(chǎn)廢水中回收酚類單體的最有效的溶劑。并且需要調(diào)節(jié)廢水的pH=2。通過三個連續(xù)的液-液逆流提取過程,得到產(chǎn)品的HT含量可以達到85.46%。1L橄欖油生產(chǎn)廢水中得到了1.225gHT5]
Mar Larrosa等采用酪氨酸酶催化酪醇,經(jīng)過羥基化反應后合成羥基酪醇。但是過程中要控制合成條件,以防氧化生成聯(lián)苯。把合成的羥基酪醇加入到番茄汁里面。
發(fā)現(xiàn)番茄汁的清除DPPH自由基以及ABTS自由基的能力加強。另外,在室溫及光照48天的條件下,加入羥基酪醇的番茄汁表現(xiàn)穩(wěn)定。羥基酪醇的濃度升高到1mg/mL時番茄汁的風味和顏色仍然保持不變。這種加入羥基酪醇的番茄汁既擁有番茄的營養(yǎng),還引入了羥基酪醇的生物活性,因此是一種非常有發(fā)展?jié)摿Φ慕】凳称?
西班牙人Juan FernandezBolanos用加熱的方法處理油橄欖提取橄欖油后的副產(chǎn)物(橄欖渣及廢水的混合物)發(fā)現(xiàn)加熱可以提高羥基酪醇的含量。他提出一種經(jīng)濟適用的純化羥基酪醇的方法,但是已經(jīng)申請專利。
國外克雷農(nóng)業(yè)公司及國內(nèi)劉岱玲從橄欖提取液中提取出羥基酪醇,但是他們都也已經(jīng)申請專利保護。
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